普遍為1.0 x 106 cells/mL。
細胞成團懸浮的原因可能有以下幾方面的原因:1)鈣,鎂離子的存在,用無鈣鎂離子的平衡鹽溶液清洗細胞;2)細胞接觸已知或著代謝廢物堆積導致細胞進入衰退期,細胞狀態變差,在懸浮培養時容易成團漂??;3)支原體污染,進行支原體檢測。
首先,在實驗室必須保證良好的無菌操作技術,最好的預防方法是定期檢測所有細胞接觸的材料和物品以保證支原體不被引入培養體系,并鑒定潛在的污染源。
懸浮細胞在傳代過程中對代次沒有要求,可以一直傳代,但需要根據使用者終產品的生產規程和最佳性能,確定最終傳代代次。
可以,初始密度1.5 x 106 cells/mL接種,正常72h可以達到10 x 106 cells/mL。
細胞不一樣,培養基情況不同。有些細胞培養基接毒前和接毒后不做更換,有些細胞的培養基前后不同。
細胞復蘇前期建議使用康寧一次性細胞培養瓶,帶透氣蓋。穩定后可使用其他培養容器,但需要注意透氣。
ATCC中可以查到絕大多數細胞培養的詳細資料。包括細胞的來源,培養和凍存條件,以及相關文獻等資料。
健順除去EB66?懸浮細胞株外,其余細胞株均購自ATCC,懸浮細胞由貼壁自主馴化而來,沒有經過任何基因改造。